热带作物学报

作者：焦展,安胜军,邵铁梅

单位： 河北化工医药职业技术学院/河北省高校生物反应器与蛋白类药物开发应用技术研发中心,河北石家庄 050026, 河北中医学院,河北石家庄 050091

关键词：金线莲,类原球茎,高效体系,诱导,总黄酮

基金：河北省高等学校科学技术研究项目(Z2015134),国家自然科学基金项目(81473578)

本研究以金线莲组培苗茎段为试材,采用“二加二”法,即“两步诱导”（1. 利用暗培养诱导出白化茎段;2. 由白化茎段诱导类原球茎）加“两步增殖”（1. 新诱导的类原球茎在诱导培养基上培养3周;2. 利用L16(4 5)正交试验优选增殖培养方案）的方法,研究外植体来源、外植体处理方式、暗培养时间、培养基及附加成分对类原球茎诱导的影响,以及培养时间、光照强度、紫外光照射时间对类原球茎增殖的影响,并比较“二加二”法与传统单步法的培养效果。结果表明,适宜白化茎段诱导类原球茎的培养基为MS + 2.5 mg/L 6-BA +0.2 mg/L NAA +1.0 mg/L S3307。黑暗腋生白化茎段是最佳外植体,最佳处理方式为整个茎段平放,3周暗培养得到的白化茎段能够显著提高类原球茎的诱导率。增殖培养5个因素对结果的影响顺序为：NH4 +/NO3 ->NAA浓度>6-BA浓度>S3307浓度>蔗糖浓度。最佳配比为MS+0.5 mg/L S3307+4.0 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA+ NH4 +/NO3 -（15 mmol∶45 mmol）+ 蔗糖40 g/L,可获得增殖鲜重为246.90 g/L。增殖培养最佳时间6周。光照强度500 lx和253.7 nm紫外光每天照射6 h连续6周适宜类原球茎的增殖和总黄酮的积累。利用“二加二”法建立了金线莲类原球茎高效培养新体系,该体系诱导率、初始材料扩大倍数、增殖倍数均高于传统单步诱导法。92%的类原球茎能够稳定增殖,不发生分化和愈伤组织化。

来源：2019年第2期

《热带作物学报》期刊编辑部

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