热带作物学报

北大核心,JST,CSCD扩展版,WJCI,

国内刊号:46-1019/S

国际刊号:1000-2561

热带作物学报杂志2019年第3期:建兰花叶病毒RT-LAMP检测方法的建立

发布日期:

作者:樊荣辉,黄敏玲,钟淮钦,罗远华,叶秀仙

单位:1. 福建省农业科学院作物研究所,福建福州 350013,2. 福建省农业科学院花卉研究中心,福建福州 350013,3. 福建省特色花卉工程技术研究中心,福建福州 350013

关键词:建兰花叶病毒,RT-LAMP,检测

基金:福建省公益类科研院所基本科研专项(2017R1026-8),福建省农业科学院科技创新团队项目(STIT2017-2-9),福建省农业科学院生产性工程化实验室中试基金项目(AG2017-2)

建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CyMV)是侵染兰花的主要病毒,严重影响其观赏价值,建立快速、灵敏的检测方法显得尤为重要。根据CyMV的外壳蛋白基因序列设计4对特异性引物,经过优化反应条件,建立该病毒的RT-LAMP 检测方法,并进行LAMP检测的特异性、敏感性检测。该方法能特异扩增CyMV,与其他4种病毒(齿兰环斑病毒、菜豆黄花叶病毒、黄瓜花叶病毒和小苍兰花叶病毒)不发生反应;灵敏度为RT-PCR的10倍。田间检测20份样品中,RT-LAMP和RT-PCR检测结果一致,检出率为60%。在产物中加入荧光染料SYBR GreenⅠ,直接用肉眼观察就可判断样品是否感染CyMV,可省去电泳分析的时间。针对CyMV建立的RT-LAMP方法具有特异性强、灵敏度高、操作简单、快速等特点,适用于在进境检疫及种苗繁育过程中的检测鉴定。

来源:2019年第3期

《热带作物学报》期刊编辑部

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