热带作物学报

作者：廖小淼,何其光,刘耀,徐良向,周晓韵,刘文波,张宇,林春花,缪卫国

单位：1. 海南大学植物保护学院,海南海口 570228,2. 热带农林生物灾害绿色防控教育部重点实验室,海南海口 570228

关键词：橡胶树,橡胶树炭疽菌,Hog1基因,蛋白纯化,原核表达

基金：国家自然科学基金项目(No. 31760499),国家自然科学基金项目(No. 31560495),现代农业产业技术体系建设专项资金项目(No. CARS-33- GW-BC1)

HOG MAPK途径在植物病原真菌生长发育、致病过程和对杀菌剂敏感性等方面发挥重要功能,但在不同的病原真菌中具有一定差异。为研究Hog1蛋白在橡胶树炭疽菌（Colletotrichum siamense）中的功能和调控机制,本研究利用同源克隆法克隆获得橡胶树炭疽菌（C. siamense）的CsHog1基因,构建GST-CsHog1融合表达载体,利用SDS-PAGE和Western Blot检测蛋白表达情况。结果表明：橡胶树炭疽菌（C. siamense）的CsHog1基因大小1383 nt,编码459个氨基酸,包含5个内含子,具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶催化结构域;聚类分析显示橡胶树炭疽菌的CsHog1基因编码的氨基酸序列与黄瓜炭疽菌的ClOsc1（Hog1同源基因）同源性最高。所构建的蛋白融合表达载体在供试条件下（IPTG 0.3、0.5、0.8、1.0 mmol/L;温度16、25、28 ℃）均可较好诱导表达,GST-CsHog1融合蛋白大小约为70 ku。用GST亲和层析柱纯化获得蛋白,经Western Blot检测显示该蛋白可与GST单克隆抗体特异性结合。

来源：2019年第5期

《热带作物学报》期刊编辑部

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