热带作物学报

作者：郭静远, 邹智, 孔华, 郭运玲, 郭安平

单位：1.海南大学生命科学与药学院,海南海口 570228,2.海南省南繁生物安全与分子育种重点实验室/中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海南海口 571101

关键词：番木瓜,脱水素,基因克隆,表达分析,原核表达

基金：海南省重点研发计划项目(ZDYF2017017),中国热带农业科学院基本科研业务费专项(1630052017011)

本研究基于转录组获得的CpDHN转录本序列,以番木瓜‘台农二号’组培苗叶片为材料,采用RT-PCR技术克隆了该基因包含完整ORF在内的425 bp cDNA序列。序列分析表明,CpDHN预测编码93个氨基酸,其理论分子量为10.50 kDa、等电点为6.62、总平均疏水指数为-1.984、核定位。除保守的K片段外,蛋白还含有1个S片段,可归为KS型脱水素。在拟南芥中的10个脱水素中,CpDHN与AtLEA8的亲缘关系最近,相似性为53.3%。值得注意的是,虽然CpDHN的编码区不存在内含子,但其3°UTR含有1个与AtLEA8类似的内含子。表达谱分析显示,该基因在根和叶片中均受干旱胁迫诱导。此外,还构建了CpDHN的原核表达载体,SDS-PAGE分析显示,该蛋白在大肠杆菌中可高效表达。这些结果为下一步的功能鉴定奠定了坚实的基础。

来源：2020年第12期

《热带作物学报》期刊编辑部

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