热带作物学报

作者：贺春萍, 董文敏, 吴伟怀, 梁艳琼, 李锐, 谢立, 黄兴, 易克贤

单位：1.中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业农村部热带作物有害生物综合治理重点实验室/海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室,海南海口 571101,2.南京农业大学植物保护学院,江苏南京 210095,3.海南大学林学院,海南海口 570228

关键词：灵芝菌,环介导等温扩增,分子检测

基金：海南省自然科学基金项目(320RC692),海南省院士创新平台科研专项(SQ2020PTZ0011),国家天然橡胶产业技术体系建设专项资金项目(CARS-33-BC1)

由灵芝菌（Ganoderma pseudoferreum）引起的红根病是橡胶上危害面积最广、影响最大的世界性根部传染性病害。本研究利用环介导等温扩增技术（LAMP）,以G. pseudoferreum线粒体Large rDNA特异片段为靶标序列,设计出G. pseudoferreum 特异性LAMP引物,以SYBR Green I为指示剂,建立基于颜色判断的直观、快速、灵敏的G. pseudoferreum LAMP检测方法,优化了反应体系和条件,进行了特异性、灵敏度及田间疑似病样的检测验证。结果表明：整个试验检测时间仅需80 min,在等温64 ℃条件下反应1 h能特异性检测出G. pseudoferreum;特异性检测中,G. pseudoferreum菌株扩增后呈阳性（绿色）,而其他真菌均为阴性（橙色）。该技术最低检测限为1′10-5 ng/μL。田间疑似病样LAMP体系检测,病原检出率为85%。本研究建立的LAMP检测技术为橡胶树红根病菌的快速鉴定提供了新技术。

来源：2021年第1期

《热带作物学报》期刊编辑部

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