热带作物学报

作者：张迎辉, 杜溶讫, 凡莉莉, 杨旺利, 荣俊冬, 郑郁善, 陈礼光

单位：1.福建农业职业技术学院,福建福州 350007,2.福建农林大学林学院,福建福州 350002,3.福安市林业局,福建福安 355000

关键词：石斛属,SRAP,反应体系,优化

基金：福建省科技创新平台项目(2008Y2001),福建农林大学科技创新专项基金项目(CXZX2017497)

建立石斛属（Dendrobium）植物SRAP-PCR反应体系,为石斛的品种鉴定与分类提供理论和技术基础。采用单因素及正交试验对反应体系中的各因子进行优化,确定最优退火温度,并筛选有效引物。结果表明：适用于石斛属植物SRAP最佳的反应体系为：Mg2+ 2.5 mmol/L,dNTPs 0.25 mmol/L,Taq DNA聚合酶1.25 U,引物0.4 μmol/L,模板DNA 30 ng,10×PCR buffer 2.5 μL,其余用灭菌后的ddH2O补足至25 μL。最优扩增程序为：94 ℃预变性5 min;94 ℃变性1 min,36 ℃复性1 min,72 ℃延伸1 min,5次循环;94 ℃变性1 min,根据不同引物的不同退火温度复性1 min,72 ℃延伸1 min,30次循环;最终72 ℃延伸7 min,保存于4 ℃恒温箱中。应用所建立的优化反应体系成功地筛选出15条多态性较高的引物。

来源：2021年第1期

《热带作物学报》期刊编辑部

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