热带作物学报

作者：刘洋, 周鹏, 庹德财, 唐庆华, 言普, 黎小瑛, 沈文涛

单位：1.海南大学园艺学院,海南海口 570228,2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所/海南热带农业资源研究院,海南海口 571101,3.中国热带农业科学院椰子研究所,海南文昌 571300

关键词：芜菁花叶病毒,槟榔坏死环斑病毒,马铃薯X病毒,VPg蛋白,侵染,本生烟

基金：海南省重大科技计划项目“槟榔黄化灾害防控及生态高效栽培关键技术研究与示范”(ZDKJ201817-1-1-1)

芜菁花叶病毒（Turnip mosaic virus, TuMV）和槟榔坏死环斑病毒（Areca plam necrotic ringspot virus, ANRSV）是马铃薯Y病毒科（Potyviridae）中分别可诱导十字花科作物和槟榔产生坏死病症的2种不同属病毒。VPg（Viral protein genome linked）作为与马铃薯Y病毒科病毒基因组5′端的结合蛋白,在病毒复制、翻译和运动等侵染过程中发挥重要作用。本研究利用In-Fusion克隆策略分别构建了可表达3′端融合Strep蛋白标签序列的ANRSV和TuMV VPg全长编码基因的马铃薯X病毒（Potato virus X, PVX）载体pPVX-VPg-AR和pPVX-VPg-Tu。通过农杆菌渗透注射接种本生烟（Nicotiana benthamiana）,利用RT-PCR、Strep蛋白标签亲和层析和Western blot等方法证明了PVX病毒载体能够介导VPg-AR和VPg-Tu蛋白在本生烟中系统表达,且发现这2种VPg蛋白的过量表达诱导本生烟叶片产生了不同程度的系统性坏死病症。进一步采用DAB和NBT染色,在产生坏死症状叶片中检测到大量活性氧（reactive oxygen species, ROS）的积累。因此,推测VPg可能是TuMV和ANRSV诱发植物病症产生的一个决定因子,为后续研究这2种病毒诱导症状形成机制奠定了基础。

来源：2021年第8期

《热带作物学报》期刊编辑部

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