热带作物学报

作者：史敏晶, 张世鑫, 丁欢, 蒋毅, 田维敏

单位：1.中国热带农业科学院橡胶研究所/农业农村部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室/省部共建国家重点实验室培育基地-海南省热带作物栽培生理学重点实验室，海南海口 571101,2.西藏农牧学院，西藏林芝 860000

关键词：巴西橡胶树,木质素,番红染色,薄壁细胞,荧光

基金：海南省基金创新团队项目(320CXTD442),国家自然科学基金项目(31870590),现代农业产业技术体系建设专项(CARS-33-YZ1)

巴西橡胶树是最重要的人工栽培产胶植物，树干割胶是当前从橡胶树乳管组织中获取天然橡胶的唯一途径。割胶后的排胶特性直接决定胶乳的产量，但其排胶机理目前尚不完全清楚。橡胶树树皮的膨压是乳管排胶的主要初动力，而细胞壁的主要成分木质素含量的高低与膨压密切相关。目前关于橡胶树树干树皮细胞中木质素含量的研究较少，缺乏通过形态结构研究分析木质素含量高低的研究。以橡胶树RY8-79和PR107成龄树树皮为研究材料，制备石蜡切片，分别以Wiesner反应方法、Máule反应方法以及番红染色结合荧光显色的方法对树皮组织中的木质素进行了染色定位分析。研究结果表明：光镜明场下，Wiesner反应方法和Máule反应方法能显色薄壁细胞壁中的木质素成分，但颜色浅淡，很难区分不同品系之间的差异；番红染色后能观察到薄壁细胞中浅紫红色的木质素成分，但不同组织以及不同品系之间同样很难区分；番红显色后结合546 nm绿光激发则能观察到木质素组织明显的红色荧光，不同细胞类型和不同品系之间差异明显，RY8-79薄壁细胞中木质素荧光明显弱于PR107，表明该品系中木质素的含量低于PR107。碘-溴染色显示次生乳管的结果表明，次生乳管分布的位置和木质素显色较深尤其是荧光强的部位一致。由此推测乳管及其周围的细胞中木质素含量较高，这一现象在PR107中尤其明显。此外，Wiesner反应和Máule反应不仅需要间苯三酚、盐酸和高锰酸钾（KMnO4）等危险化学试剂，而且反应时间不好把控，切片容易从载玻片上脱落以及细胞壁易破损；而番红染色结合荧光观察所用试剂则是安全无毒的且细胞结构完整。综合比较不同的方法，番红染色结合荧光显色是当前最适合橡胶树树皮组织细胞中木质素显色的方法，不仅能清晰区分木质素含量的高低，而且安全、简便易操作。

来源：2023年第10期

《热带作物学报》期刊编辑部

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