热带作物学报

作者：池珈仪, 刘舒璇, 向思诗, 詹若挺, 何瑞

单位：广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心/广州中医药大学岭南中药资源教育部重点实验室/广州中医药大学中药学院，广东广州 510006

关键词：毛叶芋兰,内参基因,实时荧光定量PCR,表达稳定性

基金：2022年省级乡村振兴战略专项资金种业振兴项目“广东省南药种业创新园项目”(2022-NJS-00-002),2022年省级乡村振兴战略专项资金种业振兴项目“广东省南药种业创新园项目”(粤财农[2022]184号)

毛叶芋兰（Nervilia plicata）是一种珍稀南药，目前对其有效成分及其分子调控机理鲜有报道。实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR, qRT-PCR）在植物基因表达分析中得到了广泛应用，但在毛叶芋兰中缺少研究，限制了相关工作的开展。在前期工作基础上，本研究从毛叶芋兰转录组数据库中筛选出Actin、GAPDH、TUA、UBC、UBQ、EF-1α、EF-1β、CYP、RPL 共9个常见管家基因，以毛叶芋兰叶片、叶柄和球茎3个组织部位为材料，开展qRT-PCR内参基因的筛选工作。经过9个基因在不同组织的表达水平、稳定性和综合分析，筛选出最适合的内参基因，并选择毛叶芋兰花青素合成途径关键基因NpDFR、Np3GT进行验证。 结果发现：EF-1α和CYP的表达稳定性相近，整体稳定性最好。2个内参基因单独或共同使用时，NpDFR、Np3GT在不同组织的表达情况与转录组测序结果基本一致，表明其均可用作qRT-PCR的内参基因。本研究结果为进一步开展毛叶芋兰药效相关基因的分子作用机理研究提供依据。

来源：2025年第1期

《热带作物学报》期刊编辑部

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