热带作物学报

作者：吴双, 逯锐琳, 何其光, 袁坤, 胡义钰, 王真辉, 刘进平, 刘辉

单位：1.中国热带农业科学院橡胶研究所/农业农村部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室/省部共建国家重点实验室培育基地-海南省热带作物栽培生理学重点实验室，海南海口 571101,2.海南大学热带农林学院，海南海口 570228

关键词：橡胶树,硫氧还蛋白,酵母双杂交,酵母文库构建,互作蛋白

基金：海南省重点研发项目(ZDYF2024XDNY232),国家自然科学基金面上项目(32371922),中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(1630022023008)

硫氧还蛋白通过催化硫醇-二硫键交换反应调节靶蛋白的结构和功能，在维持细胞氧化还原稳态中发挥关键作用。前期研究证实橡胶树y型硫氧还蛋白HbTRXy2具有很强的抗氧化功能。为探究HbTRXy2调控抗氧化性的分子机制，本研究构建橡胶树酵母双杂交文库及HbTRXy2诱饵载体pGBKT7-HbTRXy2，并通过酵母双杂交筛选与HbTRXy2互作的蛋白。结果显示：本研究构建的次级文库重组率为100%，插入片段平均长度大于1000 bp，库容量为3.80× 106 CFU/mL；经检测，诱饵载体pGBKT7-HbTRXy2在酵母中无毒性和自激活活性，可用于酵母双杂交筛选；采用共转化法从构建的文库中筛选到与HbTRXy2互作的蛋白24个。生物信息学分析表明，这些候选互作蛋白的功能涉及氧化还原、逆境胁迫响应、ATP结合与代谢、卡尔文循环、单碳代谢、碳固定、蛋氨酸生物合成、脂质A生物合成、金属离子结合或转运、跨膜转运、细胞体积调控、磷酸根离子稳态、蛋白质磷酸化和蛋白质折叠等。本研究结果为深入解析HbTRXy2在橡胶树中的功能及其作用机理奠定基础。

来源：2025年第6期

《热带作物学报》期刊编辑部

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