热带作物学报

作者：吴洁秋, 庄华才, 谭志勇, 李早文, 范俊强, 傅海平, 徐匆

单位：东莞市农业科学研究中心，广东东莞 523000

关键词：兰花,齿兰环斑病毒,反转录-重组酶聚合酶扩增（RT-RPA）,检测

基金：2022年度广东省基础与应用基础研究基金（区域联合基金）项目(2022A1515140182)

齿兰环斑病毒（Odontoglossum ringspot virus, ORSV）是危害兰花的主要致病病毒之一，该病毒导致兰花叶片黄化、出现斑块，花朵畸形，对兰花的观赏性和商业价值影响极大。为实现ORSV的早期快速检测，本研究根据GenBank数据库中兰花齿兰环斑病毒外壳蛋白cp基因的保守区域设计、筛选RT-RPA引物和探针，优化扩增条件，建立基于RPA的ORSV快速检测技术；对RT-RPA特异性和灵敏性进行测定，并通过开展田间样品检测试验，以验证该检测技术在生产上的应用可行性。结果表明：RT-RPA的最佳扩增引物组合为F1/R1，荧光探针为P1，最佳扩增温度为41 ℃，扩增时间为20 min；特异性良好，对建兰花叶病毒、黄瓜花叶病毒无交叉反应；灵敏度较高，ORSV核酸最低检测浓度达到2.8×10-5 ng/μL。田间样品检测中，采用齿兰环斑病毒为阳性对照，ddH2O为阴性对照，20份蝴蝶兰样本均检出ORSV，与TaqMan探针RT-qPCR （real time quantitative PCR）检测结果一致。本研究建立的ORSV RT-RPA荧光实时检测技术，具有快速、灵敏、准确和简便的优点，且适用于田间样品检测，为兰花病害预防、切断感染源和控制ORSV的传播提供有效方法，有助于兰花产业的健康发展。

来源：2025年第7期

《热带作物学报》期刊编辑部

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