热带作物学报

作者：冯彩云, 贺雅萍, 吕复兵, 陈和明, 晏石娟, 艾叶, 肖文芳

单位：1.福建农林大学风景园林与艺术学院，福建福州 350002,2.广东省农业科学院环境园艺研究所/广东省花卉种质创新综合利用重点实验室，广东广州 510640,3.广东省农业科学院农业生物基因研究中心，广东广州 510640

关键词：蝴蝶兰,腋芽,茎,石蜡切片

基金：广东省农业科学院协同创新中心项目(XT202213),广东省科技计划项目(2024B1212060012),广东省现代农业产业技术体系花卉创新团队建设项目(2024CXTD12)

蝴蝶兰茎部着生、潜伏于叶基部的腋芽在适宜环境下能够萌发并伸长分化形成花梗，其分化过程的显微观察是探明蝴蝶兰花发育进程及影响因素的重要研究内容之一。为了建立一套适用于软硬相连接的带腋芽茎段的石蜡切片方法，以蝴蝶兰金蝶（Phalaenopsis Lioulin Phoenix ‘LM41’）带腋芽的茎段为试验材料，针对主要影响石蜡切片效果的固定时长、软化液浓度和软化时长、脱水等制备步骤进行优化。结果表明：固定时对固定液抽真空并延长固定时间至48 h及以上有利于固定液充分渗透，材料固定效果最佳；使用浓度为10%、12%的氢氟酸溶液软化12、15 d并在软化期间抽真空30 min，可使木质化程度较高的茎段组织脆度和硬度大大降低，达到切片的软硬度要求，有效解决软化不均匀造成的组织分离破碎问题；脱水处理设置从30%~100%乙醇的7个逐级脱水梯度，并增加无水乙醇到二甲苯逐渐置换的步骤，可以避免蝴蝶兰组织材料收缩变形，保证组织形态的完整性。优化后的制备方法解决了常规石蜡切片中蝴蝶兰带腋芽茎段（含软硬相连接组织）的软化不彻底、组织与石蜡分离、蜡带皱缩破碎、切片空洞等问题，所获切片的整体结构趋于完整，染色均匀且鲜艳，各部位组织细胞着色明显，能清晰区分开幼嫩的芽组织和木质化的茎组织。本研究形成了一套适用于蝴蝶兰带腋芽茎段（含软硬相连接组织）的石蜡切片制备方法，为深入研究蝴蝶兰潜伏腋芽萌发的分化过程提供技术基础。

来源：2025年第7期

《热带作物学报》期刊编辑部

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