热带作物学报

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国内刊号:46-1019/S

国际刊号:1000-2561

热带作物学报杂志2025年第9期:黄瓜绿斑驳花叶病毒MP基因的原核表达及抗血清制备

发布日期:

作者:任春梅, 程兆榜, 杨柳, 李硕, 王海涛, 陆芳, 季英华

单位:江苏省农业科学院植物保护研究所, 江苏南京 210014

关键词:黄瓜绿斑驳花叶病毒,运动蛋白,原核表达,抗血清

基金:现代农业产业技术体系,国家西甜瓜产业技术体系(CARS-25-2025-G20)

黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus, CGMMV)是危害瓜类作物的重要植物病毒之一,其运动蛋白(movement protein, MP)在病毒传播和致病过程中起关键作用。本研究通过RT-PCR克隆CGMMV的MP基因,构建原核表达载体pET-32a-MP,并在大肠杆菌BL21(DE3)中成功诱导表达分子量约48 kDa的重组MP融合蛋白。利用镍柱亲和层析纯化获得高纯度蛋白(纯度≥80%),以此免疫新西南大白兔制备多克隆抗体。Western blot和ELISA分析表明,抗血清效价达409 600,且能特异性识别CGMMV侵染叶片中的MP蛋白,与烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus,WMV)等其他病毒无交叉反应。本研究实现了CGMMV MP蛋白的原核高效表达与特异性抗体制备,为病毒快速检测、免疫组织化学及蛋白功能研究提供重要工具,对保障瓜类作物安全生产具有重要意义。

来源:2025年第9期

《热带作物学报》期刊编辑部

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