国内刊号:46-1019/S
国际刊号:1000-2561
发布日期:
作者:黄境珊, 王国芬, 时涛, 李超萍, 陈奕鹏, 蔡吉苗, 李博勋, 刘先宝, 黄贵修
单位: 黑龙江八一农垦大学农学院, 黑龙江大庆 163319, 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业农村部热带作物有害生物综合治理重点实验室/海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室, 海南海口 571101, 中国热带农业科学院三亚研究院/热带作物生物育种全国重点实验室, 海南三亚 572024
关键词:木薯,斯里兰卡木薯花叶病毒,TaqMan荧光定量PCR
基金:国家木薯产业技术体系病害防控岗(CARS-11-HNHGX),热带作物生物育种全国重点实验室热带专项创新团队项目(NKLTCBCXTD32),国家重点研发计划项目(2020YFD1000600)
由斯里兰卡木薯花叶病毒(Sri Lankan cassava mosaic virus,SLCMV)侵染引起的斯里兰卡木薯花叶病是近年来我国木薯种植中新发的危险性病害。现有检测技术存在灵敏度低、效率不高等不足,限制了相关工作的开展。本研究根据病毒基因序列设计引物和探针,制备阳性质粒标准品,建立SLCMV的TaqMan荧光定量检测技术,并对其应用效果等进行验证。结果发现,该方法仅对SLCMV DNA样品产生特异性荧光信号,对阳性质粒标准品的最低检出量为4.5×101 copies/μL。标准曲线显示,Ct值与拷贝数的对数呈良好线性关系,曲线斜率为-3.1312,相关系数(R2)为0.9969,扩增效率(E)为97.9%,标准曲线方程为y=-3.1312x+34.599。利用该技术对广西和福建的2个木薯种植园供试样品进行检测,叶片阳性检出率分别达95.45%和78.57%,最低检测拷贝数为1.45×105copies/g,而田间烟粉虱携毒率为86%,最低带毒量为9.42×104 copies/头。该技术具有良好的灵敏度、特异性和重复性,可为该病的田间鉴定、早期诊断、无毒种茎评价等监控工作提供有效的技术支持。
来源:2025年第9期
《热带作物学报》期刊编辑部