热带作物学报

作者：段莹泽, 王璐, 梁思怡, 韦靖, 李佳惠, 陈思宇, 白晓丹, 黄思敏, 朱英芝

单位： 广西民族大学海洋与生物技术学院/广西多糖材料与改性重点实验室， 广西南宁 530008, 广西海洋天然产物与组合生物合成化学重点实验室， 广西南宁 530007

关键词：水稻橙叶病,植原体,快速检测,重组酶介导等温扩增-侧向流试纸条（RAA-LFD）

基金：广西自然科学基金项目(2023GXNSFAA026116),广西自然科学基金项目(2025GXNSFAA069783),广西海洋天然产物与组合生物合成化学重点试验室开放基金项目(GXMNPC2020004)

水稻橙叶病由水稻橙叶植原体（rice orange leaf phytoplasma，ROLP）侵染引起，主要通过叶蝉传播，具有传播迅速、危害范围广的特点，严重威胁我国华南地区的水稻安全生产，亟需建立快速高效的检测方法，从而有效地进行病害防控。基于重组酶介导等温扩增-侧向流试纸条联用技术（RAA-LFD），通过靶向ROLP保守基因序列设计特异性引物与探针，本研究建立了适用于田间环境的ROLP快速检测技术。优化结果显示，该方法在35 ℃等温条件下，20 min即可完成扩增与检测，且对仪器设备要求低。灵敏度验证表明，该方法对ROLP重组质粒的检测极限达1×10-4 ng/μL。特异性检测显示，仅对ROLP样品产生特异性条带，对其他水稻病害样品及健康样品无阳性反应。应用验证表明，该方法可检测感染ROLP的水稻叶片及介体昆虫电光叶蝉。在广西5个地区收集85份水稻疑似样品和112份叶蝉样品，该方法与常规PCR检测结果表现出较好的一致性，其中水稻样品一致率为100.0%，叶蝉样品一致率为98.2%。本研究建立的RAA-LFD方法具有快速、灵敏、特异、操作简便及成本低廉等优势，无需热循环设备，检测时间较常规PCR缩短70%以上，为ROLD的早期诊断、介体昆虫带毒率检测及大规模田间监测提供高效的技术工具，有望在水稻橙叶病监控工作中得到大面积应用。

来源：2026年第5期

《热带作物学报》期刊编辑部

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